Ver o Invisível: O Papel da Microscopia Electrónica no Diagnóstico dos Animais de Companhia

 

A medicina veterinária tem registrado avanços notáveis ​​nas últimas décadas, particularmente no campo do diagnóstico por imagem.

 

Entre estas inovações, a microscopia eletrônica representa uma ferramenta extremamente eficaz, mas ainda pouco utilizada no diagnóstico de animais de companhia, principalmente cães e gatos.

 

Com a sua resolução incomparável e capacidade de revelar detalhes ultraestruturais, a microscopia eletrônica oferece informações cruciais sobre uma vasta gama de processos de doença, desde infecções virais a doenças renais e câncer.

 

Neste artigo, exploramos as aplicações, os benefícios, os desafios e as perspetivas futuras da utilização da microscopia eletrônica na avaliação diagnóstica em cães e gatos.

 

O microscópio eletrônico fornecido ao Laboratório MYLAV: um dos nossos produtos bandeira!

 

O que é a Microscopia eletrônica?

 

A microscopia eletrônica é uma técnica que utiliza um feixe de eletrões, em vez de luz, para visualizar amostras de tecido. Isto permite uma resolução muito maior do que a microscopia ótica tradicional, chegando mesmo à escala nanométrica.

 

Existem dois tipos principais de microscopia eletrônica:

 

  • Microscopia Eletrônica de Transmissão (MET): produz imagens bidimensionais de alta resolução, transmitindo eletrões através de cortes ultrafinos de tecido. É ideal para a observação de estruturas intracelulares.
  • Microscopia Eletrónica de Varrimento (MEV): produz imagens tridimensionais da superfície, varrendo-a com um feixe de eletrões. É útil para estudar a morfologia e a arquitetura da superfície. Atualmente, é utilizada principalmente para fins de investigação.

 

No diagnóstico veterinário, a MET é a mais comummente utilizada, pois revela pormenores estruturais essenciais para o diagnóstico patológico e virológico.

 

Aplicações do Diagnóstico em Cães e Gatos

 

  • Infecções Virais

A MET desempenha um papel fundamental na identificação de vírus nos tecidos, especialmente quando os testes convencionais (como a PCR ou a imunohistoquímica) falham ou não estão disponíveis. Por exemplo:

– Vírus da esgana canina (CDV): as inclusões em neurónios ou células epiteliais podem ser confirmadas por MET através da identificação de partículas virais características.

– Peritonite infecciosa felina (PIF): O coronavírus causador pode ser visualizado no interior dos macrófagos, ajudando a diferenciá-lo de outras condições granulomatosas.

  • Nefropatias

As doenças glomerulares em cães e gatos requerem frequentemente avaliação ultraestrutural para classificação definitiva. Embora a microscopia ótica e a imunofluorescência sejam informativas, a MET é essencial para:

  • Detetar a fusão de podócitos na pata em doença glomerular de alteração mínima.
  • Identificar depósitos de imunocomplexos em doenças glomerulares imunomediadas.
  • Caracterizar alterações da membrana basal observadas nas nefropatias hereditárias.
  • Discinesia Ciliar

A discinesia ciliar primária é uma doença congênita que causa uma motilidade ciliar anormal, levando a infecções respiratórias crónicas. A MET permite a visualização direta de defeitos no braço da dineína ou desorganização das estruturas microtubulares nos cílios. É o padrão de diagnóstico para esta condição em cães.

  • Doenças de Armazenamento e Perturbações Lisossomais

Algumas doenças metabólicas, como as gangliosidoses, as mucopolissacaridoses ou as lipofuscinoses ceroides neuronais, apresentam inclusões citoplasmáticas identificáveis ​​pelo MET. A descoberta de corpos de zebra ou corpos citoplasmáticos ou membranosos auxilia a confirmação do diagnóstico em casos suspeitos de distúrbios neurodegenerativos ou sistêmicos.

  • Neoplasias e Caracterização Tumoral

Embora a histopatologia e a imunohistoquímica continuem a ser os principais métodos para o diagnóstico de neoplasias, a MET pode oferecer um maior nível de detalhe em casos ambíguos. Ela pode:

– Distinguir entre carcinomas, sarcomas ou tumores de células redondas pouco diferenciados com base na estrutura de organelos, grânulos secretores ou padrões de filamentos intermédios.

– Avaliar a presença de fibras de amianto nos mesoteliomas ou outras neoplasias.

  • Doenças dermatológicas complexas

Em casos de lúpus, penfigóide bolhoso ou outras doenças bolhosas autoimunes, a MET pode revelar:

– Alterações nas junções dermoepidérmicas.

– Presença de depósitos electrodensos ao longo da membrana basal.

– Alterações ultra-estruturais nos queratinócitos.

 

Vantagens da Microscopia Eletrônica

 

  • Alta Resolução

A MET revela estruturas celulares e subcelulares, como as mitocôndrias, o retículo endoplasmático e os poros, que são completamente invisíveis ao microscópio óptico. É essencial nos casos em que mesmo alterações mínimas têm valor diagnóstico.

  • Função Confirmatória e Complementar

Serve como ferramenta confirmatória quando a histologia e a imunohistoquímica fornecem resultados incertos, completando o processo de diagnóstico.

  • Arquivo

As amostras analisadas podem ser armazenadas e reutilizadas como referência para estudos futuros ou para comparações retrospectivas

 

Limitações e Desafios

 

Apesar da sua utilidade, a MET não é frequentemente utilizada em diagnósticos de rotina para animais de companhia. As suas principais limitações incluem:

 

  1. Custo e Acessibilidade

O equipamento é dispendioso e requer pessoal técnico altamente especializado. Apenas alguns centros de investigação ou laboratórios têm esta oportunidade.

 

  1. Preparação das Amostras

A preparação é mais complexa do que a histopatologia padrão. Os tecidos devem ser fixados em glutaraldeído, incluídos em resina, processados ​​como cortes ultrafinos e corados com metais pesados ​​(acetato de uranilo e citrato de chumbo).

 

  1. Interpretação Complexa

A interpretação de imagens exige um elevado nível de especialização. Os erros são possíveis se o patologista não tiver formação específica.

 

Há vários anos que o laboratório MyLav dispõe de um microscópio eletrônico de transmissão, que lhe permite realizar rotineiramente exames ultraestruturais aplicados a diversas áreas de diagnóstico, incluindo biópsias renais, diagnóstico de discinesia ciliar primária e investigação de doenças de pele.

 

Este investimento tecnológico, aliado à progressiva especialização do corpo técnico, abre importantes perspectivas para os médicos veterinários e outros profissionais, oferecendo novas possibilidades de diagnóstico e contribuindo para melhorar a precisão e a agilidade do processo clínico-diagnóstico.

 

Figura 1

Imagem MET de uma porção do glomérulo, mostrando um capilar glomerular revestido por podócitos e suportado por matriz mesangial.

Figura 2

Imagem MET de um corte transversal de um cílio respiratório, mostrando a estrutura central do axonema, composta por nove pares periféricos de microtúbulos e dois microtúbulos centrais únicos.

Luca Aresu, Médico Veterinário, PhD, Universidade de Turim, Chefe do Serviço de Histopatologia do MYLAV