{"id":30844,"date":"2025-03-05T15:40:42","date_gmt":"2025-03-05T14:40:42","guid":{"rendered":"https:\/\/www.mylav.net\/?p=30844"},"modified":"2025-03-05T15:40:42","modified_gmt":"2025-03-05T14:40:42","slug":"cytometrie-en-flux-quand-comment-et-pourquoi","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.mylav.net\/fr\/oncologie\/cytometrie-en-flux-quand-comment-et-pourquoi\/","title":{"rendered":"CYTOM\u00c9TRIE EN FLUX : QUAND, COMMENT ET POURQUOI ?"},"content":{"rendered":"

La cytom\u00e9trie en flux est une technique diagnostique avanc\u00e9e utile en cas de suspicion de <\/span>n\u00e9oplasie h\u00e9matopo\u00ef\u00e9tique<\/b>, permettant de confirmer le diagnostic, de d\u00e9finir l’immunoph\u00e9notype et de stadifier la n\u00e9oplasie elle-m\u00eame.<\/span><\/p>\n

\u00c0 ce jour, il n’est pas possible d’\u00e9valuer des n\u00e9oplasies d’une autre origine, comme les carcinomes et les sarcomes.<\/span><\/p>\n

La cytom\u00e9trie en flux permet de d\u00e9terminer la lign\u00e9e d’origine et le stade de maturation des cellules h\u00e9matopo\u00ef\u00e9tiques pr\u00e9sentes dans l’\u00e9chantillon, gr\u00e2ce \u00e0 l’utilisation d’anticorps monoclonaux qui identifient l’ensemble des prot\u00e9ines pr\u00e9sentes sur chaque cellule (profil antig\u00e9nique), caract\u00e9ristique de chaque lign\u00e9e cellulaire et variant selon le stade de maturation.<\/span><\/p>\n

L’analyse de ces donn\u00e9es permet presque toujours de distinguer les formes n\u00e9oplasiques des formes r\u00e9actives.<\/span><\/p>\n

Quand ?<\/b><\/p>\n

La r\u00e9alisation de la cytom\u00e9trie en flux est indiqu\u00e9e en cas de suspicion clinique de <\/span>n\u00e9oplasie h\u00e9matopo\u00ef\u00e9tique<\/b> (ex. leuc\u00e9mies et lymphomes), si cette suspicion est corrobor\u00e9e par les r\u00e9sultats h\u00e9matologiques, m\u00e9dullaires et cytologiques.<\/span><\/p>\n

Ainsi, la cytom\u00e9trie en flux ne doit pas \u00eatre consid\u00e9r\u00e9e comme une premi\u00e8re \u00e9tape diagnostique, mais plut\u00f4t comme un examen \u00e0 r\u00e9aliser uniquement en cas <\/span>d’indication clinique ou cytologique.<\/b><\/p>\n

Les donn\u00e9es obtenues par cytom\u00e9trie en flux doivent en effet \u00eatre interpr\u00e9t\u00e9es \u00e0 la lumi\u00e8re du tableau clinique du patient et de l’aspect morphologique des cellules. Des profils cytofluorim\u00e9triques similaires peuvent avoir des significations diff\u00e9rentes selon l’\u00e9tat clinique et les traitements pr\u00e9c\u00e9dents.<\/span><\/p>\n

Comment ?<\/b><\/p>\n

La cytom\u00e9trie en flux s’effectue sur des cellules en suspension cellulaire, donc dans un milieu liquide.<\/span><\/p>\n

Les \u00e9chantillons tels que <\/span>le<\/b> sang, les \u00e9panchements ou la moelle osseuse<\/b> peuvent \u00eatre envoy\u00e9s au laboratoire dans un tube avec <\/span>EDTA<\/b>.<\/span><\/p>\n

Pour analyser des <\/span>l\u00e9sions solides<\/b> (ad\u00e9nopathies, tumeurs, infiltrations spl\u00e9niques, etc.), il est n\u00e9cessaire de r\u00e9aliser un pr\u00e9l\u00e8vement par <\/span>aspiration \u00e0 l’aiguille fine (FNA),<\/b> comme en cytologie, et de remettre les cellules en suspension dans un milieu liquide.<\/span><\/p>\n

\u00c0 cet effet, il est possible d’utiliser du <\/span>s\u00e9rum<\/b> (0,5-1 ml) du m\u00eame patient, \u00e9ventuellement dilu\u00e9 avec une solution physiologique si n\u00e9cessaire, ou des milieux de culture cellulaire comme le RPMI. Ces pr\u00e9cautions permettent de maintenir les cellules viables plus longtemps. Il est toutefois essentiel que l’\u00e9chantillon soit envoy\u00e9 au laboratoire dans les 24 heures suivant le pr\u00e9l\u00e8vement.<\/span><\/p>\n

Il est <\/span>d\u00e9conseill\u00e9<\/b> de remettre les cellules en suspension dans une solution physiologique sans ajout de s\u00e9rum autologue, car cela entra\u00eenerait une d\u00e9g\u00e9n\u00e9rescence rapide des cellules. Les cellules doivent \u00eatre viables au moment de l’analyse, car toute d\u00e9g\u00e9n\u00e9rescence, m\u00eame partielle, peut compromettre la liaison des anticorps monoclonaux et fausser les r\u00e9sultats.<\/span><\/p>\n

Enfin, il est important d’envoyer au laboratoire des <\/span>lames<\/b> de l’\u00e9chantillon analys\u00e9, correctement pr\u00e9par\u00e9es et fix\u00e9es, afin de permettre une \u00e9valuation morphologique par cytologie.<\/span><\/p>\n

Puisque l\u2019analyse n\u2019est r\u00e9alisable que si le liquide contenant la suspension cellulaire pr\u00e9sente une quantit\u00e9 suffisante de cellules nucl\u00e9\u00e9es (leucocytes normaux ou n\u00e9oplasiques), il est recommand\u00e9 de v\u00e9rifier ce param\u00e8tre avant d\u2019envoyer le tube au laboratoire, notamment lors de l\u2019aspiration d\u2019organes solides suivie du d\u00e9p\u00f4t des cellules dans le milieu de transport. Pour ce faire, un comptage cellulaire peut \u00eatre r\u00e9alis\u00e9 \u00e0 l\u2019aide d\u2019un h\u00e9mocytom\u00e8tre standard (chambre de comptage) pour l\u2019h\u00e9matologie (si disponible dans la structure). L\u2019envoi du tube au laboratoire ne doit \u00eatre envisag\u00e9 que si la suspension contient plus de 10 000 leucocytes. Dans le cas contraire, il est pr\u00e9f\u00e9rable de r\u00e9aliser des <\/span>ponctions suppl\u00e9mentaires (FNA) <\/b>sur l\u2019organe concern\u00e9 afin d\u2019augmenter la concentration cellulaire dans l\u2019\u00e9chantillon.<\/span><\/p>\n

Enfin, il est essentiel de proc\u00e9der \u00e0 la cytologie et \u00e0 la cytom\u00e9trie en flux <\/span>avant<\/b> toute intervention th\u00e9rapeutique (autant que possible en fonction des imp\u00e9ratifs cliniques). En effet, les traitements par corticost\u00e9ro\u00efdes ou chimioth\u00e9rapies provoquent la lyse des cellules lympho\u00efdes et, plus largement, des cellules n\u00e9oplasiques, ce qui peut conduire \u00e0 des \u00e9chantillons non exploitables sur le plan diagnostique.<\/span><\/p>\n

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Figure 1. Proc\u00e9dure de pr\u00e9l\u00e8vement des l\u00e9sions solides et pr\u00e9paration de l\u2019\u00e9chantillon destin\u00e9 \u00e0 la cytom\u00e9trie en flux.<\/span><\/i><\/p>\n

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Pourquoi ?<\/b><\/p>\n

Le principal <\/span>avantage de la cytom\u00e9trie en flux<\/b> r\u00e9side dans la nature du pr\u00e9l\u00e8vement (\u00e0 l’aiguille fine), beaucoup moins invasif qu’une biopsie chirurgicale. Souvent, la cytologie suffit \u00e0 orienter vers une n\u00e9oplasie h\u00e9matopo\u00ef\u00e9tique\/\u00e0 cellules rondes. Cependant, dans certains cas, l’interpr\u00e9tation du tableau cytologique peut \u00eatre complexe, et seuls des tests compl\u00e9mentaires comme la cytom\u00e9trie en flux permettent de confirmer ou d’infirmer la pr\u00e9sence d’une n\u00e9oplasie.<\/span><\/p>\n

Compar\u00e9e aux autres techniques d’immunoph\u00e9notypage (immunocytochimie ou immunohistochimie), la cytom\u00e9trie en flux permet d’analyser un plus grand nombre de marqueurs sur les m\u00eames cellules et simultan\u00e9ment, offrant ainsi une meilleure classification des n\u00e9oplasies. La cytom\u00e9trie en flux permet d’obtenir un typage cellulaire dans des d\u00e9lais tr\u00e8s courts (g\u00e9n\u00e9ralement en moins de 48 heures) et \u00e0 co\u00fbt r\u00e9duit. Elle doit \u00eatre utilis\u00e9e pour <\/span>confirmer<\/b> et <\/span>classifier<\/b> les n\u00e9oplasies h\u00e9matopo\u00ef\u00e9tiques.<\/span><\/p>\n

Cependant, la cytom\u00e9trie en flux ne permet pas d’\u00e9valuer la morphologie des cellules. Elle doit donc \u00eatre <\/span>pr\u00e9c\u00e9d\u00e9e ou accompagn\u00e9e d’un examen cytologique<\/b>. De plus, dans certaines situations, l’\u00e9valuation de la distribution tissulaire des cellules n\u00e9oplasiques est n\u00e9cessaire, ce qui ne peut \u00eatre r\u00e9alis\u00e9 que par un <\/span>examen histologique.<\/b><\/p>\n

Associ\u00e9e \u00e0 la cytologie, la cytom\u00e9trie en flux est essentielle pour classifier correctement une n\u00e9oplasie h\u00e9matopo\u00ef\u00e9tique, permettant d’\u00e9tablir un pronostic pr\u00e9cis et de d\u00e9finir la meilleure approche th\u00e9rapeutique.<\/span><\/p>\n

Exemples de classifications possibles :<\/b><\/p>\n