{"id":27579,"date":"2024-09-10T16:03:43","date_gmt":"2024-09-10T14:03:43","guid":{"rendered":"https:\/\/www.mylav.net\/?p=27579"},"modified":"2024-09-10T16:03:43","modified_gmt":"2024-09-10T14:03:43","slug":"parr-instrucciones-y-actualizaciones-para-un-uso-correcto","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/www.mylav.net\/es\/blog-es\/parr-instrucciones-y-actualizaciones-para-un-uso-correcto\/","title":{"rendered":"PARR: instrucciones y actualizaciones para un uso correcto"},"content":{"rendered":"<p>La PARR es una t\u00e9cnica molecular desarrollada recientemente en medicina veterinaria para el diagn\u00f3stico de neoplasia linfoide o de proceso reactivo: hagamos un balance de la situaci\u00f3n con esta actualizaci\u00f3n de nuestros expertos.<\/p>\n<p>El diagn\u00f3stico diferencial entre enfermedad linfoide reactiva y neopl\u00e1sica en perros y gatos puede resultar complicado en algunos pacientes y, dado el diferente pron\u00f3stico y tratamiento, un diagn\u00f3stico correcto suele resultar crucial. La prueba de clonalidad (PARR) eval\u00faa la variabilidad del reordenamiento gen\u00e9tico de los receptores de ant\u00edgenos de los linfocitos, puede ser una herramienta v\u00e1lida para integrar la interpretaci\u00f3n citol\u00f3gica, histol\u00f3gica e inmunohistoqu\u00edmica, cuando \u00e9stas no son concluyentes.<\/p>\n<p>Intentemos aclarar el m\u00e9todo y proporcionar una actualizaci\u00f3n en comparaci\u00f3n con nuestra publicaci\u00f3n anterior en este blog.<\/p>\n<p><strong>\u00bfQu\u00e9 es la t\u00e9cnica PARR?<\/strong><\/p>\n<p>Es una t\u00e9cnica de biolog\u00eda molecular (PCR) mediante la cual se analizan los reordenamientos gen\u00e9ticos de las c\u00e9lulas linfoides a nivel de las regiones VDJ de los genes de inmunoglobulinas (IG) de los linfocitos B y del receptor espec\u00edfico de los linfocitos T (T-Cell Receptor).<\/p>\n<p><strong>\u00bfQu\u00e9 es el reordenamiento de IG y TCR?<\/strong><\/p>\n<p>Los genes IG y TCR contienen varios segmentos de genes V, D y J que se reordenan aleatoriamente durante las fases iniciales del proceso de crecimiento y diferenciaci\u00f3n de los linfocitos, confiriendo una gran variabilidad gen\u00e9tica, con el fin de asegurar una alta capacidad por parte de los receptores de los linfocitos B y T de reconocer ant\u00edgenos muy diferentes.<\/p>\n<p><strong>\u00bfPor qu\u00e9 se llama PARR?<\/strong><\/p>\n<p>PARR es el acr\u00f3nimo de \u201cPCR for antigen receptor rearrangements\u201d.<\/p>\n<p><strong>\u00bfSobre qu\u00e9 sustrato se realiza la PARR?<\/strong><\/p>\n<p>La prueba de clonalidad se realiza utilizando ADN gen\u00f3mico extra\u00eddo de tejidos fijados con formalina e incluidos en parafina para su examen histol\u00f3gico. Adem\u00e1s, se puede procesar a partir de preparaciones citol\u00f3gicas, incluidas las te\u00f1idas, y de efusiones cavitarias. El tejido fresco o congelado representa una matriz apropiada.<\/p>\n<p><strong>\u00bfPueden las diferentes matrices afectar al resultado final de la PARR?<\/strong><\/p>\n<p>S\u00ed. El ADN gen\u00f3mico extra\u00eddo de preparados citol\u00f3gicos y efusiones suele ser escaso y de baja calidad. Adem\u00e1s, las c\u00e9lulas linfoides presentes en la muestra citol\u00f3gica pueden no ser representativas de toda la lesi\u00f3n, provocando un error de interpretaci\u00f3n de la PARR (especialmente falsos negativos). En general, no se recomienda realizar la PARR en preparaciones citol\u00f3gicas y efusiones, especialmente sin inmunofenotipado. Las muestras enviadas para el examen histol\u00f3gico, normalmente m\u00e1s representativas de la lesi\u00f3n, son m\u00e1s adecuadas para este tipo de an\u00e1lisis.<\/p>\n<p><strong>\u00bfCU\u00e1l es la utilidad de la PARR?<\/strong><\/p>\n<p>En teor\u00eda, nos permite distinguir entre procesos reactivos\/inflamatorios con componente linfocitario (policlonales) y procesos neopl\u00e1sicos linfoides (monoclonales).<\/p>\n<p><strong>\u00bfEs la PARR una prueba definitiva para el diagn\u00f3stico?<\/strong><\/p>\n<p>No, por definici\u00f3n los resultados PARR (perfiles de electroforesis) nunca son diagn\u00f3sticos ni patognom\u00f3nicos de un proceso espec\u00edfico y siempre deben interpretarse junto con datos cl\u00ednicos, morfol\u00f3gicos (histolog\u00eda\/citolog\u00eda) e inmunofenot\u00edpicos (citometr\u00eda de flujo\/inmunohistoqu\u00edmica). Por lo tanto, las pruebas de clonalidad por s\u00ed solas no son definitivas.<\/p>\n<p><strong>\u00bfPuedo utilizar la PARR para identificar el fenotipo de la neoplasia?<\/strong><\/p>\n<p>No, la PARR no debe considerarse como la t\u00e9cnica de diagn\u00f3stico principal para determinar el fenotipo (B o T). Otras herramientas, como la citometr\u00eda de flujo, el examen inmunohistoqu\u00edmico y el examen inmunocitoqu\u00edmico son las pruebas indicadas para determinar el fenotipo de una neoplasia linfoide.<\/p>\n<p><strong>\u00bfCu\u00e1ndo solicito la PARR?<\/strong><\/p>\n<p>Puedo solicitar la PARR posteriormente a la recopilaci\u00f3n adecuada de datos cl\u00ednicos y procedentes de la anamnesis, toma(s) de muestra(s) para examen citol\u00f3gico e histol\u00f3gico y examen inmunohistoqu\u00edmico. El laboratorio, que ya dispone de la muestra de tejido en parafina, podr\u00e1 realizar la PARR tras la solicitud de una prueba adicional.<\/p>\n<p><strong>\u00bfQu\u00e9 resultados de PARR existen y c\u00f3mo los interpreto?<\/strong><\/p>\n<p>Los perfiles de electroforesis se clasifican en diferentes categor\u00edas representadas por esquemas arquet\u00edpicos.(Figuras 1-4):<\/p>\n<ul>\n<li><strong>Clonal: <\/strong>suele ser indicativo de un proceso neopl\u00e1sico. Se detecta un \u00fanico producto de amplificaci\u00f3n y de tama\u00f1os esperados.<\/li>\n<li><strong>Policlonal: <\/strong>generalmente indicativo de un proceso reactivo. Se detectan varios productos de amplificaci\u00f3n de diferentes tama\u00f1os.<\/li>\n<li><strong>Pseudoclonal: <\/strong>puede estar asociado a un proceso reactivo o neopl\u00e1sico. Se detecta un pico clonal no repetible en dos r\u00e9plicas diferentes.<\/li>\n<li><strong>Ning\u00fan producto espec\u00edfico: <\/strong>puede estar asociado a un proceso reactivo o neopl\u00e1sico. No se detectan productos de amplificaci\u00f3n.<\/li>\n<\/ul>\n<p>Figura 1: ejemplo de un amplificado monoclonal de dimensi\u00f3n esperada.<\/p>\n<p><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" class=\"alignnone  wp-image-27581\" src=\"https:\/\/www.mylav.net\/wp-content\/uploads\/2024\/09\/Senza-titolo-300x170.png\" alt=\"\" width=\"521\" height=\"295\" \/><\/p>\n<p>Figura 2: ejemplo de amplificado policlonal m\u00faltiple y de peque\u00f1a dimensi\u00f3n.<\/p>\n<p><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" class=\"alignnone  wp-image-27588\" src=\"https:\/\/www.mylav.net\/wp-content\/uploads\/2024\/09\/Senza-titolo2-300x171.png\" alt=\"\" width=\"519\" height=\"296\" \/><\/p>\n<p>Figura 3: ejemplo de amplificados monoclonales no repetibles en dos amplificaciones diferentes (una de 137 pb y la otra de 115 pb).<\/p>\n<p><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" class=\"alignnone  wp-image-27595\" src=\"https:\/\/www.mylav.net\/wp-content\/uploads\/2024\/09\/Senza-titolo3-300x207.png\" alt=\"\" width=\"497\" height=\"343\" \/><\/p>\n<p>Figura 4: ejemplo de amplificado negativo (no se observan productos de amplificaci\u00f3n).<\/p>\n<p><img loading=\"lazy\" decoding=\"async\" class=\"alignnone  wp-image-27602\" src=\"https:\/\/www.mylav.net\/wp-content\/uploads\/2024\/09\/Senza-titolo4-300x171.png\" alt=\"\" width=\"537\" height=\"306\" \/><\/p>\n<p><strong>\u00bfExisten l\u00edmites?<\/strong><\/p>\n<p>Diversos aspectos t\u00e9cnicos y biol\u00f3gicos afectan la sensibilidad y especificidad de la PARR, dando lugar a resultados negativos, falsos positivos o la formaci\u00f3n de productos pseudoclonales. Las siguientes im\u00e1genes esquem\u00e1ticas enumeran las causas principales:<\/p>\n<table style=\"height: 341px;\" width=\"928\">\n<tbody>\n<tr>\n<td width=\"214\"><strong>Falso Negativo:<\/strong><\/p>\n<p>debe sospecharse si los resultados de PARR entran en conflicto con los datos cl\u00ednicos, morfol\u00f3gicos e inmunofenot\u00edpicos<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<p>&nbsp;<\/td>\n<td width=\"326\">\u25cf\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0 <strong>Condici\u00f3n de cobertura inadecuada del <em>primer<\/em><\/strong> que ocurre cuando el clon neopl\u00e1sico utiliza genes no reconocidos por el <em>primer.<\/em><\/p>\n<p>\u25cf\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0 <strong>Mutaciones a nivel de las secuencias de nucle\u00f3tidos iniciales o terminales del gen<\/strong>: condici\u00f3n que se presenta cuando no se produce la amplificaci\u00f3n debido a la ausencia de uni\u00f3n del <em>primer.<\/em><\/p>\n<p>\u25cf\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0 <strong><em>Presencia de fondo policlonal<\/em><\/strong><em>: condici\u00f3n que ocurre cuando la lesi\u00f3n neopl\u00e1sica se origina en un contexto de inflamaci\u00f3n.<\/em><\/td>\n<\/tr>\n<\/tbody>\n<\/table>\n<table style=\"height: 378px;\" width=\"930\">\n<tbody>\n<tr>\n<td width=\"214\"><strong>Falso Positivo:<\/strong><\/p>\n<p>revisi\u00f3n de picos monoclonales reproducibles en ausencia de neoplasia<\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n<p>&nbsp;<\/td>\n<td width=\"326\"><strong>Lesiones inflamatorias con expansi\u00f3n clonal provocadas por est\u00edmulo antig\u00e9nico espec\u00edfico:<\/strong><\/p>\n<p>\u25cb\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0 histiocitoma en regresi\u00f3n<\/p>\n<p>\u25cb\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0 pseudolinfoma y linfocitosis cut\u00e1nea<\/p>\n<p>\u25cb\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0 hipersensibilidad a medicamentos<\/p>\n<p>\u25cb\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0 Infecciones por Ehrlichia y Leishmania<\/p>\n<p><strong>Reordenamientos can\u00f3nicos<\/strong>: condiciones en las que los linfocitos presentan poco reordenamiento de la regi\u00f3n VDJ.<\/td>\n<\/tr>\n<\/tbody>\n<\/table>\n<table style=\"height: 294px;\" width=\"931\">\n<tbody>\n<tr>\n<td width=\"214\"><strong>Pseudoclonalidad:<\/strong><\/p>\n<p>identificaci\u00f3n de un clon no reproducible despu\u00e9s de la repetici\u00f3n de la prueba<\/p>\n<p>&nbsp;<\/td>\n<td width=\"326\"><strong>Resultado no discriminante entre lesi\u00f3n inflamatoria o neopl\u00e1sica:<\/strong><\/p>\n<p>\u25cb\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0 muestra con un n\u00famero bajo de c\u00e9lulas diana (neopl\u00e1sicas)<\/p>\n<p>\u25cb\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0 tejidos u \u00f3rganos con fondo linfoc\u00edtico (bazo o ganglio linf\u00e1tico)<\/p>\n<p>\u25cb\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0\u00a0 muestras paucicelulares: biopsias citol\u00f3gicas y endosc\u00f3picas<\/td>\n<\/tr>\n<\/tbody>\n<\/table>\n<p><strong>Dr. Michele Marino, responsable de biolog\u00eda molecular de MYLAV<\/strong><\/p>\n<p><strong>Dr. Luca Aresu, responsable de patolog\u00eda de MYLAV<\/strong><\/p>\n<p><strong>Dr. Walter Bertazzolo, Director Cient\u00edfico de MYLAV<\/strong><\/p>\n<p>&nbsp;<\/p>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"<p>La PARR es una t\u00e9cnica molecular desarrollada recientemente en medicina veterinaria para el diagn\u00f3stico de [&hellip;]<\/p>\n","protected":false},"author":4,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"_acf_changed":false,"inline_featured_image":false,"footnotes":""},"categories":[1141],"tags":[],"class_list":["post-27579","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-blog-es"],"acf":[],"yoast_head":"<!-- This site is optimized with the Yoast SEO plugin v28.3 - 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